禄米-PCR移动核酸检测实验室案例剖析

一、PCR实验室概况：

实验室面积：100平米

承制单位：广州禄米实验室设备科技有限公司

二、实验室活动内容：

核酸检测;

国家要求按照第二类病原微生物进行管理。*培养、动物感染实验应在生物安全三级及以上实验室开展;未经培养的感染性材料的操作应在生物安全二级实验室进行，同时采用生物安全三级实验室的个人防护;灭活材料的操作应在生物安全二级实验室进行。*核酸检测应当在生物安全二级实验室进行，同时采用生物安全三级实验室的个人防护。

三、平面布局

四、工作流程

试剂准备---样本准备---扩增及产物分析

试剂准备区：

PCR实验室中为“洁净”的区域，不应有任何核酸的存在，包括试剂中所带的标准品和阳性对照。

所有实验用洁净物品如离心管、吸头等的存放和准备处。

商品试剂盒：75%乙醇、焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水、NaOH等可能需要自配

自制试剂：一次较大量配制，然后分装成小瓶保存，每次检测时，取出一小瓶使用，未用完的即弃掉，不再使用。

仪器设备主要有加样器、天平、离心机和冰箱。

标本制备区：

仪器设备主要有生物安全柜、超净台、加样器、高速台式(冷冻)离心机、加热模块或水浴箱、冰箱等。生物安全柜不应放在实验室门口等易受人员走动影响的地方，也不应直对分体式空调。

主要是用于核酸样本的提取，标本的制备应在生物安全柜内进行，可防止标本气溶胶的扩散。

加样器吸头须带滤芯。

使用加热模块时，如在模块孔中填入二氧化硅细砂，然后将标本管置于细砂中温育，可得到较为一致的温育温度。

扩增和产物分析区：

扩增反应体系的配制和提取核酸的加入，可在标本制备区也可在本区内进行，

加样时，先加提取的核酸模板样本，每加完一个即盖好盖子，然后加阳性质控核酸模板，再就是标本制备阴性质控和仅含按样本一样稀释的主反应混合液的扩增阴性质控，这样做的目的是，较大可能地测出以前扩增产物的交叉污染。

产物分析区是临床基因扩增检验的*后一个工作区域，也是需要打开扩增后反应管进行扩增产物分析检测的地方。是PCR实验室“不洁净”的区域。

仪器设备有、荧光定量PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、测序仪、(酶标仪和洗板机)、核酸杂交仪、恒温设备等。

五、环境控制

1、实验室采用全新风全排风的系统，根据客户需求配置直膨机或普通空调系统，其换气次数大于15次/小时，，室内温度为18~26度，湿度小于75%，噪音<60dB(A);

2、室内压力为整体负压，单向气流;送排风形式为上送，下回。

3、气流组织示意如下：

4、压差自控控制系统

压差值：

试剂准备缓冲间 +10pa

试剂准备间 +15pa

标本制备间缓冲 +5pa

标本制备间 -5pa

扩增及产物分析缓冲-5pa

扩增及产物分析 -15pa

以上压差自控调节。

六、三废处理

1、废气排放：高效过滤排风系统采用《 高效空气过滤器》GB13554

2、废水排放：经过污水处理设备废水排放符合《水污染综合排放标准DB11-307-2013>

3、医疗固废：独立污物传递窗传至室外，第三方具有医疗废物回收资质公司回收处理。

七、设计依据

• 《*感染的肺炎实验室检测技术指南》

• 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法2010》

• 《GB 50346-2011 生物安全实验室建筑技术规范》

• 《GB19489-2008实验室生物安全通用要求》

• 《GB50849-2014：传染病医院建筑设计规范》

• 《T/CECS662-2020医学生物安全二级实验室建设技术标准》

• 《GB/T35428-2017：医院负压隔离病房环境控制要求》

• 《WS 233-2002微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》

• 《*感染的肺炎实验室检测技术指南》

• 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法2010》

• 《GB 50346-2011 生物安全实验室建筑技术规范》

• 《GB19489-2008实验室生物安全通用要求》

• 《GB50849-2014：传染病医院建筑设计规范》

• 《T/CECS662-2020医学生物安全二级实验室建设技术标准》

• 《GB/T35428-2017：医院负压隔离病房环境控制要求》

• 《WS 233-2002微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》