1.基本要求有以下几点:
① 无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空诙菌。*小内间面积2*2. 5= 5m2,外间面积1*2= 2m2,高以2.5m下为宜,都应有天花板。
② 在分隔内间与外间的墙壁或隔扇上,应开一一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽1500px、高000px>厚750px,内外都挂对拉的窗扇。
③ 内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台*远的位置上;外间的]*好也用拉门,要设在距内间*远的位置上。
④ 无菌室容积小而严密,使用- - 段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台*远的位置),*好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启,以流通空气。也可安装恒温恒湿机。
2.无菌室内设备和用具
① 无菌室内的工作台,不论是什么材质、用途的,都要求表面光滑和台面水平。
② 内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
③ 在内室和外室各安装.个紫外灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方,离地面2m,外室的紫外线可安装在外室中央。(3)外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
3.无菌室的灭菌消毒
① 喷雾:在每次使用无菌室前进行o喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。(3)紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30~60mino
② 萤蒸:这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行萤蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺藁蒸。
4.无菌室工作规程
① 无菌室灭菌。每次使用前开自紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min,对内外室用5%石炭酸喷雾。
② 用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室换上已灭菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口置,然后用2州煤酚皂液将手浸洗2分钟。
③ 将各种需用物品搬进内室清点、就位,用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾,返回外室,5~ 10min后再进内室工作。
④ 接种操作前,用70%酒精棉球擦手;进行无菌操作时,动作要轻缓,尽里减少空气波动和地面扬尘。
⑤ 工作中应注意安全。如遇棉塞着火,用手紧握或用湿布包裹熄灭,切勿用嘴吹,以免扩大燃烧;如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用浸闰5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
⑥ 工作结束,立即将台面收拾干净,将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后,对无菌室用5%石炭酸喷雾,或开紫外线灯照射30min.